商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
重組人腫瘤壞死因子α蛋白抗體 | 100ug、500ug | CS-A2413 |
商品詳情:
英文名稱:Recombinant human TNF-Alpha protein, GST
中文名稱:重組人腫瘤壞死因子α蛋白
別 名Tumor necrosis factor-α; TNFalpha; APC1; Cachectin; DIF; Differentiation inducing factor; Macrophage cytotoxic factor; MCF; Necrosin; TNF a; TNF alpha; TNF; TNF Macrophage Derived; TNF Monocyte Derived; TNF Superfamily Member 2; TNFA; TNFSF2; Tumor necrosis factor ligand superfamily member 2; Tumor Necrosis Factor Precurso; Tumour Necrosis Factor Alpha; Recombinant human TNF-Alpha protein, GST
理論分子量43kDa
性 狀Lyophilized or Liquid
濃 度>0.5 mg/ml
物 種Human
序 列77-233/233
純 度>95% as determined by SDS-PAGE
純化方法AC
內(nèi)毒素Not analyzed
表達(dá)系統(tǒng)E.coli
活性Not tested
標(biāo)簽GST
緩 沖 液10 mM TBS (pH=7.4)
保存條件Stored at -70℃ or -20℃. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
產(chǎn)品介紹This gene encodes a multifunctional proinflammatory cytokine that belongs to the tumor necrosis factor (TNF) superfamily. This cytokine is mainly secreted by macrophages. It can bind to, and thus functions through its receptors TNFRSF1A/TNFR1 and TNFRSF1B/TNFBR. This cytokine is involved in the regulation of a wide spectrum of biological processes including cell proliferation, differentiation, apoptosis, lipid metabolism, and coagulation. This cytokine has been implicated in a variety of diseases, including autoimmune diseases, insulin resistance, and cancer. Knockout studies in mice also suggested the neuroprotective function of this cytokine. [provided by RefSeq, Jul 2008]
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,并帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標(biāo)記(如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),則不需要二抗。但這樣成本很高,因?yàn)橐环N一抗只識別一種底物。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測標(biāo)記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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脫羧酶-65 | 重組人腫瘤壞死因子α蛋白抗體3-磷酸甘油酸激酶(3-Phosphoglycerate kinase,PGK)試劑盒 | A-875(人黑色素瘤細(xì)胞) |
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抗體的化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時,或位于酶的催化位點(diǎn)時,化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及基,也可與糖基共價結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的會對化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用;
8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。
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