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大鼠elisa試劑盒使用期間注意事項(xiàng)

瀏覽次數(shù):941發(fā)布日期:2021-07-20
  大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本,標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠IL-4會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體,該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物TMB,若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4,則HRP會(huì)使無色TMB變成不同深淺(正相關(guān))的藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色;在2max=450nm(OD=450nm)處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中大鼠IL-4的濃度。
  大鼠elisa試劑盒注意事項(xiàng):
  1.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請(qǐng)不要使用過期的試劑。
  2.試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請(qǐng)丟棄。
  3.試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù)30min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
  4.在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè),且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
  5.為避免交叉污染,請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用1次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
  6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上,使用前請(qǐng)離心處理(5-10S即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時(shí),請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
  7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
  8.為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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